Типы микроскопов флуоресценции
При микроскопы были изобретены около 1600 CE, натурфилософов обратили свои взоры на мир в мире. При Энтони ван Левенгук созданный небольшие, высоко-изогнутые линзы и механический держатель для регулировки вид, он открыл окно на микроскопическом мире бактерий, клетки крови, простейшие и клеточной структуры растений. Но на протяжении всей истории микроскопии, там всегда было один вопрос: Что это за странные вещи, замеченные через объектив? Флуоресцентная микроскопия относится к набору приемов, которые минимизирует что неопределенность - потому что в флуоресцентной микроскопии, когда свет сиял на образец, он сияет свой свет обратно. Эпифлуоресцентной
эпифлуоресцентной микроскопы блеск и собирать свет через те же оптики. <Р> До сих пор наиболее распространенным флуоресцентный микроскоп является конфигурация эпифлуоресцентной. В эпифлуоресцентной микроскопом, источник света - как правило, ртуть или ксеноновая лампа - светит через фильтр, который выбирает узкую область длин волн. Фильтрованный свет светит на образец через объектив микроскопа. Входящий свет поглощается флуорофорами - молекулярных меток, которые испускают свет с длиной волны, когда они поглощают свет более коротких длин волн. Свет от флуорофорами, наряду с рассеянного света от источника освещения, идет обратно в объектив и детектор или глаз. Попутно еще блоки отфильтровать освещающего света, поэтому все, что осталось, это флуоресцентный свет от образца.
Каталог
конфокальной Каталог
<р> эпифлуоресцентной микроскоп собирает свет от везде в поле зрения микроскопа. Некоторые из возбуждающего света поглощается до фокальной плоскости микроскопа, некоторые в фокальной плоскости, а некоторые за фокальной плоскости. Потому что микроскоп собирает все, что свет, изображение будет содержать четкое изображение света в фокусе, но он также будет иметь выход в фокусе свет из других регионов. Конфокальный микроскоп фиксирует, что при фокусировке лазерного пятна в той же плоскости, как микроскоп сфокусирован. Затем обскуры идет в перед детектором, где он блокирует весь свет, что исходит не от фокуса микроскопа. При сканировании образца, чистый трехмерное изображение объекта может быть получено.
МНОГОФОТОННЫХ
В флуоресцентным микроскопом свет исходит от молекул в образце. <Р> В конфокальной микроскопии выравнивание очень чувствительна. Если лазерного пятна, объектив микроскопа, собирающие оптика и обскуры выключены даже малейшее количество производительности микроскоп страдает. Многофотонное микроскоп получает вокруг этой проблемы с помощью длины волны лазерного излучения, что только половина, как энергичный, как это должно быть, чтобы возбудить флуорофоров в образце. Единственный способ флуорофоры получите взволнован и излучают свечение, если лазерный луч достаточно яркий, так что две частицы света - фотоны - ударить флуорофора в очень короткое время. Это происходит только тогда, когда лазер фокусируют на очень маленьких месте. Так единственное место в образце, который будет излучать свет, где лазер фокусируется, который держит изображение красивым и чистым, потому что нет никаких дополнительных фоне света, чтобы избавиться от -. Что означает отсутствие крошечное отверстие для выравнивания Каталог
полного внутреннего отражения флуоресценции (TIRF)
один образец может иметь несколько флуорофоры. <Р> Еще один способ получить очень чистые изображения, чтобы убедиться, свет возбуждения не получите очень далеко в образце. Если сгусток нейронов, например, помещают в каплю раствора на предметном стекле, то некоторые из нейронов будет прилипать к поверхности стекла. В общей внутренней флуоресцентной отражения (TIRF) микроскопии свет направлен в сторону в стекле, так что на самом деле не сделать это в раствор холдинга клетки. Но часть света едва просачивается в растворе - только в непосредственной близости от поверхности стекла. Это означает, что только места, которые будут испускают свет будет очень тонкой области вплотную к поверхности стекла. За то, как нейроны, где так много интересные вещи происходит на поверхности клеток, этот метод может быть очень эффективным
Каталог
Супер-Резолюция Каталог
<р> Все микроскопы. - в том числе флуоресцентных микроскопов - ограничены физики, который регулирует распространение света. Одним из основных правил является то, что сфокусированного пятна света может получить только настолько мал, - и не меньше. Для видимого света, что размер составляет около 200 нанометров, или 200 миллиардных долей метра. Но отдельные молекулы находятся всего в нескольких нанометров, так что есть много интересных особенностей, которые ниже этого предела размера, называемых дифракционный предел. Ученые разрабатывают методы "супер-разрешения" красться вокруг этого предела. Истощение выбросов Структурированное освещение микроскопии (SIM), и стимулировали (STED) микроскопии, например, оба флуоресценции методы микроскопии, которые ограничивают размер светоизлучающего месте, уменьшая размер возбуждающего света месте. Каталог
< ш> Каталог
эпифлуоресцентной микроскопы блеск и собирать свет через те же оптики. <Р> До сих пор наиболее распространенным флуоресцентный микроскоп является конфигурация эпифлуоресцентной. В эпифлуоресцентной микроскопом, источник света - как правило, ртуть или ксеноновая лампа - светит через фильтр, который выбирает узкую область длин волн. Фильтрованный свет светит на образец через объектив микроскопа. Входящий свет поглощается флуорофорами - молекулярных меток, которые испускают свет с длиной волны, когда они поглощают свет более коротких длин волн. Свет от флуорофорами, наряду с рассеянного света от источника освещения, идет обратно в объектив и детектор или глаз. Попутно еще блоки отфильтровать освещающего света, поэтому все, что осталось, это флуоресцентный свет от образца.
Каталог
конфокальной Каталог
<р> эпифлуоресцентной микроскоп собирает свет от везде в поле зрения микроскопа. Некоторые из возбуждающего света поглощается до фокальной плоскости микроскопа, некоторые в фокальной плоскости, а некоторые за фокальной плоскости. Потому что микроскоп собирает все, что свет, изображение будет содержать четкое изображение света в фокусе, но он также будет иметь выход в фокусе свет из других регионов. Конфокальный микроскоп фиксирует, что при фокусировке лазерного пятна в той же плоскости, как микроскоп сфокусирован. Затем обскуры идет в перед детектором, где он блокирует весь свет, что исходит не от фокуса микроскопа. При сканировании образца, чистый трехмерное изображение объекта может быть получено.
МНОГОФОТОННЫХ
В флуоресцентным микроскопом свет исходит от молекул в образце. <Р> В конфокальной микроскопии выравнивание очень чувствительна. Если лазерного пятна, объектив микроскопа, собирающие оптика и обскуры выключены даже малейшее количество производительности микроскоп страдает. Многофотонное микроскоп получает вокруг этой проблемы с помощью длины волны лазерного излучения, что только половина, как энергичный, как это должно быть, чтобы возбудить флуорофоров в образце. Единственный способ флуорофоры получите взволнован и излучают свечение, если лазерный луч достаточно яркий, так что две частицы света - фотоны - ударить флуорофора в очень короткое время. Это происходит только тогда, когда лазер фокусируют на очень маленьких месте. Так единственное место в образце, который будет излучать свет, где лазер фокусируется, который держит изображение красивым и чистым, потому что нет никаких дополнительных фоне света, чтобы избавиться от -. Что означает отсутствие крошечное отверстие для выравнивания Каталог
полного внутреннего отражения флуоресценции (TIRF)
один образец может иметь несколько флуорофоры. <Р> Еще один способ получить очень чистые изображения, чтобы убедиться, свет возбуждения не получите очень далеко в образце. Если сгусток нейронов, например, помещают в каплю раствора на предметном стекле, то некоторые из нейронов будет прилипать к поверхности стекла. В общей внутренней флуоресцентной отражения (TIRF) микроскопии свет направлен в сторону в стекле, так что на самом деле не сделать это в раствор холдинга клетки. Но часть света едва просачивается в растворе - только в непосредственной близости от поверхности стекла. Это означает, что только места, которые будут испускают свет будет очень тонкой области вплотную к поверхности стекла. За то, как нейроны, где так много интересные вещи происходит на поверхности клеток, этот метод может быть очень эффективным
Каталог
Супер-Резолюция Каталог
<р> Все микроскопы. - в том числе флуоресцентных микроскопов - ограничены физики, который регулирует распространение света. Одним из основных правил является то, что сфокусированного пятна света может получить только настолько мал, - и не меньше. Для видимого света, что размер составляет около 200 нанометров, или 200 миллиардных долей метра. Но отдельные молекулы находятся всего в нескольких нанометров, так что есть много интересных особенностей, которые ниже этого предела размера, называемых дифракционный предел. Ученые разрабатывают методы "супер-разрешения" красться вокруг этого предела. Истощение выбросов Структурированное освещение микроскопии (SIM), и стимулировали (STED) микроскопии, например, оба флуоресценции методы микроскопии, которые ограничивают размер светоизлучающего месте, уменьшая размер возбуждающего света месте. Каталог
< ш> Каталог